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實驗動物小型豬

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實驗小型豬(minipig, sus scorfa domestica)屬于哺乳綱、偶蹄目、野豬科、豬屬、豬種動物。小型豬體型矮小,12月齡的成年小型豬體重約為30-40kg。

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(一)生物學特性

1、一般特性及生活習性

(1)小型豬是雜食性動物,食量大、耐粗飼。不反芻,采食能力強,具有較強的消化吸收各種飼料的能力,喜食甜食。嗅覺靈敏,具有吻突,好用吻突到處拱。

(2)小型豬愛干凈,通常不在吃睡處排糞尿,并呈一定的糞尿排泄規律。

(3)小型豬具有合群性,群內存在以強欺弱現象,常見的有為搶奪飼料和地盤而爭斗。

(4)小型豬性行為包括發情、求偶和交配行為,母豬發情期的特異表現有外陰潮紅,分泌物增加,接受公豬的爬跨。管理人員按壓發情母豬背部時出現靜立反射,這是衡量母豬發情的一個重要標志。

(5)豬的汗腺不發達,皮下有脂肪層,因此不耐炎熱。

2、解剖學特點

(1)骨骼系統:小型豬的頸椎7塊,胸椎14塊,腰椎5~6塊,薦椎4塊,尾椎21~22塊。門齒和犬齒發達,齒冠尖銳突出。恒齒齒式為門齒3/3,犬齒1/1,前臼齒4/4,臼齒3/3(總:44)。

(2)消化系統:唾液腺發達。單胃,在近食管口端有一扁圓椎形突起,稱憩室;賁門腺占胃的大部分,幽門腺比其他動物寬大。膽囊濃縮膽汁的能力低,且肝分泌膽汁的數量也少。消化特點介于食肉類和反芻類之間。

(3)呼吸系統:汗腺不發達,對外界溫度和濕度變化敏感。

(4)皮膚結構特點:小型豬和人的皮膚不僅組織結構相似,在上皮修復再生性方面、皮下脂肪層和燒傷后內分泌與代謝的改變方面也十分相似。有實驗表明,2~3月齡小豬的皮膚解剖特點與人最接近。

3、生理學特點

小型豬的血液學和血液生化常數和人相當接近。豬正常體溫39℃(38~40℃),心率安靜時55~60次/分,呼吸頻率12~18次/分。收縮壓169(144~185)mmHg,舒張壓108(98~120)mmHg。血液pH7.57(7.36~7.39),紅細胞6.4×106mm-3,血紅蛋白13.7(13.2~14.2)g/100mL,白細胞(7.53~16.82)×103mm-3,血小板2.4×105mm-3。

因品(種)系不同、繁育條件差異等,小型豬生理學指標會有較大的差異。小型豬為全年多發情動物,一般雌性的性成熟為4~8月齡,雄性的性成熟為6~10月齡,性周期21天,發情期2.4天,最適交配期在發情開始后的10~25h,妊娠期114(109~120)天,產仔數2~12頭,哺乳期60天左右,小型豬的胎盤類型屬上皮絨毛膜型。初生仔豬體內沒有母源抗體,只能從初乳中獲得。由于妊娠期短,經產母豬一年能產2胎。壽命最長達27年,平均為16年。

(二)小型豬在生物醫學研究中的應用

由于小型豬的心血管、消化器官、免疫系統及腎、皮膚、眼球、鼻軟骨等在解剖、組織、生理和營養代謝等方面與人類極為相似,故目前已逐漸成為研究人類疾病的實驗動物。

1、皮膚燒傷的研究:由于小型豬的皮膚與人非常相似(體表毛發的疏密、表皮厚薄、表皮形態學和增生動力學、燒傷皮膚的體液和代謝變化機制等),故小型豬是進行皮膚燒傷損傷研究的較理想動物。

2、腫瘤研究:辛克萊小型豬可作為研究人類黑色素瘤的良好動物模型。該品種豬80%可發生自發性皮膚黑色素瘤,有典型的皮膚自發性退行性變,與人黑色素瘤病變和演變方式完全相同。

3、免疫學研究:剛出生的仔豬,體液內免疫球蛋白含量極少,但可從母豬的初乳中得到。無菌豬體內沒有任何抗體,一經接觸抗原就能產生極好的免疫反應。可利用這些特點進行免疫學研究。

4、心血管研究:小型豬冠狀動脈循環在解剖學、血流動力學方面與人類很相似,因而常用于老年性冠狀動脈病研究。幼豬和成年豬也會自然發生動脈粥樣硬化,其粥樣變前期可與人相比,而且小型豬和人對高膽固醇飲食的反應是一樣的,因此小型豬是研究動脈粥樣硬化理想的動物模型

5、糖尿病研究:尤克坦小型豬(墨西哥無毛豬)是糖尿病研究中的一個很好的模型動物。只需一次靜脈注射水合阿脲(200mg/kg體重)就可以在這種動物中產生典型的急性糖尿病。

6、發育生物學和畸形學等的研究:新生仔豬和幼豬的呼吸系統、泌尿系統和血液系統與新生嬰兒很相似,所以仔豬廣泛應用于營養和嬰兒食譜的研究。由于母豬泌乳期長短適中,一年多胎、每胎多仔,易獲得和便于操作,所以仔豬成為發育生物學、畸形學、兒科學研究的理想動物模型

7、遺傳性和營養性疾病的研究:豬可用于遺傳性疾病如先天性紅細胞病、先天性肌肉痙攣、先天性小眼病、先天性淋巴水腫等,營養代謝病如卟啉病、食物源性肝壞死等疾病的研究。

8、悉生豬和小型豬心臟瓣膜的應用:悉生豬和無菌豬可用于研究各種細菌、病毒感染性疾病,以及寄生蟲病、血液病、代謝性疾病和其他疾病。利用豬的心臟瓣膜修補人的心臟瓣膜缺損或其他疾患,目前國外已普遍推廣,每年可達十數萬例,近年來我國臨床上也已開始應用。

9、口腔學科研究:小型豬的牙齒解剖結構與人類相似,飼喂致齲齒食物可產生與人類一樣的齲損,是復制齲齒的良好動物模型。

10、藥理學研究和新藥研發及安全性評價:世界各國食品和藥品管理局規定,新藥進入人體臨床試驗之前,必須要通過至少兩種動物種類的安全性及毒性評估,其中至少一種是非嚙齒類大型動物,通常為猴、犬和豬。小型豬因體型小、倫理關注度比犬和猴低、與人類生理功能較相似等優勢,在新藥研發中的用量逐年上升。

11、異種移植研究:小型豬的腎臟結構、心臟結構等與人體相似,是最理想的異種器官供體。已有報道,基因敲除α-1,3半乳糖基轉移酶克隆豬的心或腎移植到狒狒體內,分別成活179天和83天。目前,臨床上豬胰島細胞移植治療胰島素依賴性糖尿病已有數千。

12、外科學研究:由于小型豬體型矮小、體重輕,且其腹壁可安裝拉鏈,拉鏈對其正常生理功能干擾不大,保留時間可達40天以上,這為科學研究和臨床治療中需反復手術的問題提供了較好的解決辦法。

13、其他領域的應用:應用小型豬進行醫療器械生物效能測試及安全性評價、生物制品研制(如甲型H1N1流感疫苗)以及應用豬血制備人用纖維蛋白封閉止血劑已獲得成功。

(三)小型豬常用的品種、品系

1、國外主要小型豬品種:

(1)哥廷根小型豬(Göttingen minipigs):由德國哥廷根大學育成,以明尼蘇達小型豬和越南小型野豬雜交培育而成。目前哥廷根小型豬包括17個家系,其中8個有色系,9個無色系。被廣泛使用的實驗用哥廷根小型豬來自丹麥的艾利伽德哥廷根小型豬繁育場,提供商品化的哥廷根小型豬為白色品系,艾利伽德哥廷根小型豬性成熟:♂3~4個月;♀4~5個月。6個月體重12~16kg;12個月體重20~27kg。常用于致畸形實驗、藥物代謝、異種移植和皮膚實驗等研究,是世界上應用最廣泛的實驗用小型豬。

(2)明尼蘇達·霍麥爾小型豬(Minnesota Hormel):是第一個小型豬品系。這是以美國明尼蘇達州州立大學L M Winsters教授為核心的研究人員在Hormel研究所中,從1949年開始,歷經15年選育而成的小型豬。初生個體重0.76kg,6月齡22kg,12月齡48kg。均產仔數6.3頭,育成4~5頭。毛色為黑白斑。

(3)皮特曼·摩爾小型豬(Pitman-Moor):美國皮特曼·摩爾公司育成的實驗用小型豬。其原始基礎群是佛羅里達半島上的野豬。這種小型豬頭大,顏面部突起,耳直立。毛色有白色、黑白斑、褐色帶黑斑等多種變異,但多為黑白斑。

(4)尤卡坦小型豬 (Yucatan miniature swine):原產于墨西哥南部的天然小型品種,美國從墨西哥引進后在科羅拉多州立大學進行封閉培育。美國的辛克萊研究中心現在擁有2個尤卡坦小型豬生產基地。尤卡坦小型豬包括白色尤卡坦、灰色尤卡坦和微型尤卡坦。尤卡坦小型豬性情溫順,易于實驗操作,其白色系特別適合皮膚研究,其自發性室間隔缺損家系是先天性室間隔缺損研究的良好模型。

(5)辛克萊型小型豬(Sinclair miniature swine):由明尼蘇達的密蘇里大學比較醫學研究所選育得到。辛克萊小型豬的突出特點包括生長緩慢、易于鑒別的不同被毛顏色。在骨質疏松癥模型研究方面已積累了豐富的資料。辛克萊小型豬的一個家系可形成自發退行性惡性黑色素瘤,自發率高達50%~60%。6個月平均體重:♂23kg;♀25kg。

2、國內主要小型豬品種:

(1)西藏小型豬:西藏小型豬來源于藏豬,是我國小型豬資源中最為稀缺的珍貴品種。2004年南方醫科大學實驗動物中心顧為望教授等人從西藏林芝地區引進藏豬,在廣州進行實驗動物化培育并將其命名為西藏小型豬。毛色純黑,具有耐寒、耐粗飼、生長慢、體格小、性成熟早、抗感染及抗逆性強等獨特的生物學特征。西藏小型豬長期生活在高原缺氧環境,其心臟和呼吸系統組織學有其獨特的一面。

(2)廣西巴馬小型豬:從1987年開始,廣西大學王愛德教授等從原產地引入廣西地方豬種巴馬香豬,已完成了封閉群和近交系的培育。該小型豬頭部和臀部黑色,全身其他部分白色,號稱“兩頭烏”。具有體形矮小、性成熟早、多產、遺傳背景相似等優點。

(3)五指山小型豬:又稱老鼠豬,主產于海南省五指山區。被毛黑色或白色,或背部黑色腹部白色等,有頭小、耳小、腰背平直、臀部不發達、四肢細長等特點。反應靈敏,善于奔跑。具有性成熟早、遺傳穩定、代謝率低、適應性強等優良特性。

(4)版納微型豬:版納微型豬是由云南農業大學曾養志教授等經過17年、14代親子或兄妹交配培育而成,具有抗逆性、抗病力較強、耐粗飼等特點。

(5)貴州小香豬:1985年,貴州中醫學院甘世祥教授等以原產于貴州叢江縣的叢江香豬為基礎種群進行定向選育。其有體軀小、被毛全黑、皮薄細嫩、耳小、四肢短細等特征,但繁殖力較低。

(四)小型豬的飼養管理

1、小型豬對環境的溫濕度變化敏感,適宜溫度為18~25℃。夏季時可用水噴淋或用風扇等降低豬只體溫,避免發生熱應激。小型豬日給食1~2次,一日的飼料量一般為體重的2%~3%。飼料配方可根據實驗條件靈活調整。

2、母豬斷奶后一般經7~10天會再次發情可進行配種繁殖。斷奶、轉欄和換料對仔豬均會造成較大的應激,應給予清潔飲水,換料時以漸進方式逐漸調整過度,避免發生營養性下痢。

3、小型豬要進行預防接種,主要是接種豬瘟和口蹄疫疫苗。日常應觀察豬的食欲、糞便等有無異常,如出現喘氣、腹瀉、發熱等癥狀時要及時治療。

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