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熒光蛋白手冊(cè)
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將示蹤基因敲入到小鼠內(nèi)源基因的或5'端或3'端，且與內(nèi)源基因融合表達(dá)，可以確定內(nèi)源蛋白的亞細(xì)胞定位（如圖3所示）。熒光標(biāo)簽插入位置的決定因素：1. 已有文獻(xiàn)的報(bào)道，首先考慮已有的參考模型；2. N端或C端有無(wú)蛋白修飾，避免插入的位置進(jìn)行蛋白翻譯后的修飾；3. 離主要功能域遠(yuǎn)的N端或C端，確保蛋白正常功能的行使。總之，熒光標(biāo)簽插入的位置應(yīng)盡量避免影響蛋白的正常功能。01熒光蛋白的由來(lái)圖2. 熒光蛋白發(fā)展史 (A)， FPs的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)（B）02熒光蛋白的分類表1. 通用熒光蛋白參數(shù)表RFPs（紅色熒光蛋白）：mCherry具有優(yōu)異光穩(wěn)定性，是最通用紅色單體（但融合表達(dá)時(shí)有較弱的齊聚效應(yīng)）
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